凱氏定氮儀精準測定糧食粗蛋白的步驟

  1 原理
　　在樣品消化液中加入適量鋁片和固氫氧化納，從而利用強堿與鋁反應產生氫氣和大量熱，使樣品消化液中的按鹽以氨的形式排出：
　　NH3隨著HZ進入硼酸吸收液被吸收，后通過鹽酸滴定硼酸吸收液所消耗的體積數，即可確定樣品中粗蛋白含量。
　　2 材料與方法
　　2.1材料
　　2.1.1試劑分析純固體氫氧化鈉。鋁片：用輸液瓶鋁蓋，每個剪成4小片，并預先用5%NaOH浸泡數分鐘，然后用清水洗至中性，涼干；也可用鋁電線打壓成片狀，經洗滌處理。其它試劑同GB.
　　2.1.2樣品面粉、不米面、小米、大米，
　　2.2方法
　　2.2.1樣品消化同GB方法。
　　2.2.2瀏定取5ml定容混勻的消化液于25oml三角瓶中，加新蒸餾水Zoml,加29鋁片，后加59固體NaOH,立即蓋上帶有彎管的橡皮塞，并將彎管末端插入盛有30ml%硼酸液內km深處（硼酸液預先加2滴混合指示劑），反應10分鐘。取下吸收瓶，用olmol/L鹽酸標準液滴定至淺紫色即達終點，同時做空白試驗，然后根據滴定消耗鹽酸量，按GB計算公式計算樣品粗蛋白干基含量。
　　3 結論與討論
　　3.1實驗結果
　　3.1.1對比實驗在與原標準方法對比試驗中，二者結果無顯著差異（P>0.05）月。改進法測定結果略高八方么。實驗見表1
　　3.1.2準確度與精度實驗選用分析純硫酸錢作標準物進行含氮量試驗，其結果見表2.由表2可見，改進法測定硫酸按含氮量的標準差為0.03,變異系數為0.2%,相對wucha0.52%.
　　3.2方法討論
　　3.2.1本法特點 所需凱氏定氮儀設備簡單，試劑亦極為普通，操作更為簡便、快速，無需加熱設備，既節約費用，又便于基層推廣。
　　3.2.2實驗條件
　　選擇本法中固體NaOH和鋁片的使用量直接影響著樣品消化液中氨的蒸餾與吸收程度，為此，我們用已知蛋白質含量樣品，并采取其它實驗條件不變，而僅改變某一條件量進行了鋁片、固體NaOH加入量和蒸餾反應時間的試驗，初步結果我們認為：鋁片29,固NaOH5g,反應蒸餾時間10分鐘，即可達到較滿意的測定效果。
　　3.2.3實驗注意事項
　　3.2.3.1實驗中有大量HZ放出，所以需注意避免明火。
　　3.2.3.2樣品消化液要隨稀釋隨蒸餾測足，不能放置太久，否nylJ影響測定結果。
　　3.2.3.3加入鋁和氫氧化鈉時。其順序不可顛倒，且鋁片不要剪得過碎，否則，產生H:速度過快，會影響硼酸對氨的吸收效果。
　　3.23.4蒸燦元畢后樣品殘液堿度較大，需注意防腐和燒傷；另外，導管末端需用少量蒸餾水沖洗二次，洗液入硼酸吸收液。